Protocolos de aislamiento de fagos

Para empezar a trabajar con fagos hay que preparar los medios de cultivo.

Medio LEM (1 litro) para crecer las bacterias

		Concentración final
Bacto triptona	10 g
Extracto de levadura	5 g
NaCl	5 g
1 M MgS04 x 7H20	10 ml o 1.66 gr	10 mM

Se ajusta a 1 litro y se esteriliza por autoclave

Debemos preparar 2x1litro en dos Erlenmeyers. A un Erlenmeyer añadiremos 15 gr de agar para preparar un medio de 1.5 % de agar que plaquearemos en placas Petri una vez esté autoclavado. Al otro Erlenmeyer le añadiremos 7 gr de agar para preparar un medio 0.7% que se mantendrá en el Erlenmeyer hasta que se use.

Para diluir los fagos se usa

SM (1 litro)

NaCl	5.8 gr
1 M MgS04 x 7H20	2.0 gr
1 M Tris.HCl pH 7.4	50 ml
2% gelatina	5 ml o 0.1 gr

Se ajusta a 1 litro y se esteriliza por autoclave