El diagnóstico definitivo de las enfermedades infecciosas causadas por micobacterias se basa en la demostración de su agente etiológico. Esto se consigue, entre otras formas, por histopatología, mediante la tinción bacilos ácido alcohol resistentes (BAAR) en los tejidos obtenidos in vivo o en la autopsia. La Tinción de Ziehl-Neelsen sirve para teñir Nocardias y Mycobacterium, bacterias con una cubierta cerosa.
Las colonias de Mycobacterium tuberculosis son cerosas, de una consistencia casi seca, lo que da a entender lo impermeables que son estas bacterias.
La coloración clásica de Ziehl-Neelsen requiere calentamiento para que el colorante atraviese la pared bacteriana que contiene ceras. Al suspender el calentamiento y enfriar con agua, provoca una nueva solidificación de los ácidos grasos de modo que el colorante ya no puede salir de las bacterias.
Preguntas:
PREGUNTA 1: ¿Qué ocurre con la tinción de Ziehl-Neelsen cuando las preparaciones se dejan tiempo prolongado en el alcohol-ácido, en vez de 1 min, 30 minutos?
a) No le ocurre nada excepto que las bacterias no alcohol/HCl pueden desaparecer
b) Que el carbol fucsina desaparece
c) Que el azul de metileno no puede penetrar
d) Que el cristal del portaobjetos se degrada con el ácido
e) Que hay que volver a calentar el portaobjetos
Solución: a)
PREGUNTA 2: En el protocolo dice que hay que dejar el alcohol ácido sobre el portaobjetos de 1 a 2 minutos. Si no se da el tiempo suficiente de decoloración ¿Qué ocurre?
a) Otras bacterias y contenidos del frotis pueden retener la carbol fucsina, dando como resultado falsos positivos
b) El azul de metileno puede retenerse en las bacterias alcohol/HCl resistentes
c) El carbol fucsina no penetra en las células dando falsos negativos
d) La carbol fucsina se difumina y no se retiene creando una imagen con una resolución satisfactoria
e) Se le castiga al laboratorista colgándole dos horas de los dedos gordos de los pies
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