Cómo evalular la actividad antibacteriana de aceites esenciales

Piper aduncum. Los aceites esenciales de determinadas plantas son una fuente de compuestos con actividades antimicrobianas. 

1. Evaluación de actividad antibacteriana (MIC) por microdilución

Inóculo bacteriano

Aceite esencial a evaluar

Placa de microdilución

Resazurina (indicador colorimétrico)

Estufa a 37 °C

Micropipetas

Medio BHI

Preparación

Precalienta la estufa a 37 °C (como si fuera el horno).

Añade 100 μL del inóculo en cada pocillo de la placa (como servir la base).

Agrega 100 μL del aceite esencial en cada columna, ajustando las concentraciones finales entre 512 y 0.5 μg/mL.

Repite todo por triplicado.

Incuba la placa a 37 °C durante 24 horas.

Pasado ese tiempo, añade 20 μL de resazurina a cada pocillo.

Espera 1 hora.

Observa el color: aquí determinas la CIM (MIC) por inspección visual.

Ensayo de modulación de actividad antibiótica

Amikacina

Gentamicina

Aceite esencial (a concentración subinhibitoria: MIC/8)

Suspensión bacteriana

Medio BHI al 10%

Tubos de ensayo

Placa de microdilución

Preparación

En un tubo, mezcla:

150 μL de suspensión bacteriana

Solución con 10% de BHI

Aceite esencial a MIC/8  

Prepara un tubo control igual, pero sin aceite esencial.

Toma 100 μL de cada mezcla y pásalos a los pocillos correspondientes de la placa. 

En el primer pocillo de cada fila, añade 100 μL del antibiótico (amikacina o gentamicina).

Realiza diluciones seriadas del antibiótico a lo largo de la fila. Haz todo por triplicado.

Incuba y determina la CIM igual que en la receta anterior.

2. Método de evaluación de MICs de aceites esenciales por difusión en disco

1. Objetivo

Evaluar la actividad antibacteriana de un aceite esencial mediante el método de difusión en disco y determinar la concentración mínima inhibitoria (MIC) en microorganismos sensibles.

2. Materiales y reactivos

Aceite esencial a evaluar

Discos de papel estériles (5 mm)

Caldo BHI (Brain Heart Infusion)

Caldo Mueller–Hinton (Britaina® Ref B0213705)

Agar TSA (Tryptic Soy Agar, Sigma Aldrich)

Tween 20 (0,1% v/v)

Solución salina estéril al 0,85%

Estándar McFarland N.º 0.5

DMSO (dimetilsulfóxido)

Antibióticos de referencia:

Oxacilin® BBLTM (1 µg)

Vancomicyn® Himedia (30 µg)

Cefuroxime® Oxoid (30 µg)

Aztreonam® Oxoid (30 µg)

Imipenem® BBLTM (10 µg)

Placas de Petri estériles

Micropipetas y puntas estériles

Incubadora a 37 °C

3. Preparación del inóculo bacteriano

Mantener las cepas en caldo BHI a temperatura ambiente.

Transferir 2,5 mL del cultivo a caldo Mueller–Hinton.

Incubar a 37 °C durante 18 h.

Diluir el cultivo en solución salina estéril al 0,85% hasta obtener una turbidez equivalente al estándar McFarland 0.5 (≈ 1 × 10⁶–10⁸ UFC/mL).

4. Siembra en placas

Preparar placas con agar TSA + Tween 20 al 0,1% v/v.

Extender uniformemente el inóculo sobre la superficie de cada placa usando un hisopo estéril.

5. Preparación de los discos con aceite esencial

Colocar discos de papel estériles (5 mm) sobre la superficie de las placas inoculadas.

Pipetear 5–10 μL del aceite esencial puro sobre cada disco.

Dejar reposar las placas 30 min a temperatura ambiente para permitir la difusión inicial.

6. Incubación

Incubar las placas a 37 °C durante 24 h.

7. Lectura del halo de inhibición

Medir el diámetro del halo de inhibición alrededor de cada disco.

Expresar los resultados en milímetros (mm).

Incluir controles positivos con antibióticos de referencia para validar la sensibilidad de las cepas.

8. Determinación de la MIC

Solo para microorganismos que presentaron halos de inhibición.

Preparar diluciones del aceite esencial en DMSO dentro del rango 5–10 μg/mL.

Aplicar 10 μL de cada dilución sobre discos de papel estériles.

Colocar los discos sobre placas inoculadas con la bacteria correspondiente.

Incubar a 37 °C durante 24 h.

Definir la MIC como la concentración más baja que inhibe el crecimiento bacteriano visible.

Incluir un control negativo con discos impregnados solo con DMSO.

9. Repetibilidad

Repetir todos los experimentos tres veces para asegurar reproducibilidad.

10. Referencia: 

Este protocolo sigue una metodología similar a la descrita en estudios previos realizados con otras especies vegetales: Rojas, J., Buitrago-Díaz, A., Ramírez, H., & Fernández-Moreira, E., 2025. Chemical composition and antibacterial activity of essential oil from Baccharis nitida (Ruiz & Pav.) Pers. (Asteraceae). leaves collected in Mérida-Venezuela. J Essent Oil-Bear Plants. 28(2), 340-351. https://doi.org/10.1080/0972060X.2025.247655¿

¿Qué es mejor microdilución o difusión en disco?

Para Para publicación seria / comparar MIC con otros autores → microdilución.

Para Para cribado inicial / mostrar visualmente la actividad → discos y halos.

1. Método de difusión en disco (halos de inhibición)

Ventajas:
Muy sencillo: ideal para un primer cribado de múltiples aceites o fracciones.
Visual: los halos impresionan en fotos (docencia, posters, introducción de artículos).
Pocos recursos: discos, placas, pipeta y listo.
Problemas específicos con aceites esenciales:
Difusión irregular: los aceites son hidrofóbicos; difunden mal y de forma heterogénea en agar.
Un aceite muy activo puede dar halo pequeño solo porque difunde mal.
Difícil estandarización: el tamaño del halo depende de:
Volumen aplicado
Viscosidad del aceite
Solvente usado
Grosor del agar
No da una MIC verdadera: puedes decir “tiene actividad”, pero la concentración efectiva en el frente del halo es desconocida.

Bueno para: “¿Mi aceite hace algo contra esta bacteria?”
Malo para: “¿Cuál es la MIC exacta? ¿Puedo compararla con otros estudios?”

2. Método de microdilución (en caldo, con o sin resazurina)

Ventajas claras:
Entrega una MIC definida:
Sabes la concentración exacta que inhibe el crecimiento (ej. 64 μg/mL).
Permite comparar entre estudios y compuestos:
Puedes decir “este aceite es más potente que tal antibiótico/otro aceite”.
Se adapta bien a aceites esenciales:
Usas un solvente/emulsionante (DMSO, Tween, etc.) para dispersar el aceite.
El contacto aceite–bacteria es más homogéneo que en agar.
Permite hacer también MBC (inoculando en placas desde los pocillos).
Desventajas:
Más trabajo técnico: preparación de diluciones seriadas, controles, lectura (turbidez, resazurina, etc.).
Necesitas cuidar bien el efecto del solvente (ver controles con DMSO/Tween).
Requiere más tiempo de diseño experimental.
Ideal para: estudios serios de eficacia, tablas de MIC, comparación entre especies de Piper, benchmarking frente a antibióticos.
Menos vistoso, pero mucho más sólido científicamente.

Ramón y Cajal en el trazo: redescubriendo las pinturas docentes de la UCM

 Video: Ramón y Cajal en el trazo: redescubriendo las pinturas docentes de la UCM

El libro Ramón y Cajal en el trazo aborda el estudio, contextualización y puesta en valor de la colección de lienzos docentes concebidos por Santiago Ramón y Cajal para la enseñanza universitaria de la histología y la anatomía del sistema nervioso; esta relevante colección, hasta ahora apenas divulgada y estudiada, forma parte de la colección de la Universidad Complutense de Madrid. La obra se estructura en varios apartados que analizan, desde perspectivas complementarias, la figura de Cajal como científico, docente y dibujante, el papel de estos cuadros en la pedagogía médica de su tiempo, y su relevancia histórica, científica y artística. 

El volumen se inscribe en el proyecto de investigación, digitalización y conservación-restauración impulsado por la Universidad Complutense de Madrid con el apoyo de la Fundación Ramón y Cajal Abogados y la colaboración de Factum Foundation. Dicho proyecto ha permitido recuperar materialmente las obras, estudiar su técnica y documentarlas mediante tecnologías digitales de alta resolución, garantizando su preservación y difusión.

Las imágenes digitalizadas a alta resolución aquí reproducidas constituyen un eje central del libro. Su análisis permite comprender el papel fundamental que la representación gráfica desempeñó en la formulación y difusión de los descubrimientos de Ramón y Cajal, evidenciando la estrecha relación entre ciencia y arte que caracteriza su legado.

El virus daña a los individuos pero fortalece la estructura social

Hoy un alumno preguntó, cuando les explicaba la evolución de la célula, si había pruebas de que lo que les había contado realmente fue verdad. Les hablé de los estromatolitos.  En 2021 un trabajo sobre estromatolitos ha puesto de relevancia el papel de los virus en la formación de estos biofilms gigantes. 

Lo que, según estos investigadores, ocurre es lo siguiente: los virus se infiltran en el núcleo de la cianobacteria e influyen en el metabolismo del anfitrión, insertando genes y eliminando otros. El resultado es que aumenta la supervivencia de la estera microbiana y selecciona los genes que potencialmente influyen en la precipitación de carbonatos, básicamente el proceso por el que los microbios vierten el ‘hormigón’ para construir sus ‘bloques de apartamentos’, los estromatolitos". O dicho de otra forma. El virus hace que se desintegren las membranas de las bacterias, se mueran y al mismo tiempo se libere al medio el contenido celular, resultando en la precipitación química de minerales y finalmente la formación de estromatolitos. El virus daña a los individuos pero fortalece la estructura social. 

Fig. 1. Estromatolitos en la bahía Shark, de Australia occidental. (Foto: UNSW Sydney / Brendan Burns)

Referencia: 

Between a Rock and a Soft Place: The Role of Viruses in Lithification of Modern Microbial Mats. https://doi.org/10.1016/j.tim.2020.06.004

Las arquitectas de la vida

 

Pag. 16. "Las células inventaron las plantas y los animales al adquirir la capacidad de utilizar los genes para cooperar y comunicarse entre si de forma permanente" Esta frase tiene varios errores como decir "inventaron" o "capacidad de utilizar los genes" Pero el error más clamoroso es el de "cooperar de forma permanente". La cooperación permanente es dependencia. Tu cooperas cuando obtienes algo a cambio, o algo en el futuro. Cuando eso que esperas obtener no se da, no vuelves a cooperar con quien te engañó. Si cooperas de manera permanente es que no estás cooperando.

Comparar una célula con una colmena es una analogía que me ha volado la cabeza. 

Premio Nobel de Medicina 2025: la Escuela de Posgrado de los linfocitos

Voy a explicar en qué consiste el Premio Nobel de Medicina de 2025 con una metáfora. Se trata de la metáfora de la "Escuela de linfocitos". ¿Qué es una escuela de linfocitos? es donde, los linfocitos, antes de salir al torrente sanguíneo, entran en contacto con antígenos del propio cuerpo. Si se unen a los antígenos propios entonces se les da una señal para que se reordenen y dejen de unirse a lo propio o directamente se les da una señal para que se suiciden. Si, por lo que sea, los linfocitos que reaccionan con antígenos propios salen al torrente sanguíneo causarán enfermedades autoinmunes. 

Aunque la "escuela" principal de los linfocitos ocurre en los órganos linfoides primarios (como el timo para los linfocitos T), donde se da la tolerancia central, la tolerancia inmunitaria periférica podría compararse con una especie de “formación continua” o “escuela de posgrado” para linfocitos que ya han salido al torrente sanguíneo. Los tres investigadores que descubrieron esta "Escuela de posgrado" son los que han ganado este año el Premio Nobel.

Analogía extendida: la escuela periférica de linfocitos:

Alumnos problemáticos (linfocitos autorreactivos): Algunos linfocitos escapan del control inicial y podrían atacar tejidos propios.

 Maestros reguladores (células T reguladoras): Enseñan a los linfocitos a comportarse, suprimen respuestas inapropiadas.

 Expulsión o reeducación:

 Si el linfocito no aprende, se elimina (deleción clonal).

 Si muestra potencial, se reprograma (anergia o conversión a T reguladora).

 Zonas de silencio (órganos inmunoprivilegiados): Lugares donde los linfocitos no tienen permitido actuar libremente, como si fueran áreas restringidas del campus.

El parásito no reina sobre tierra, sino sobre conciencias

 El competidor necesita un territorio

Hay peces pelágicos que frezan libremente. En este caso el territorio es prescindible. El pez globo, como especie, se las ha ingeniado para hacer que los machos compitan por un territorio en el que aparearse con las hembras. La  competición estriba en fabricar discos simétricos en la arena del fondo del mar. Los machos requieren un territorio cuando compiten entre si. 

Fig. 1. Disco simétrico creado por el pez globo macho. La simetría es lo que atrae a las hembras

El territorio de un macho siempre es una hembra. El pez diablo macho nace con la boca sellada y un olfato bien desarrollado. Utilizan ese olfato para rastrear las feromonas de la diabla, que se convierte en la única posibilidad de evitar la muerte. Si no encuentran pareja mueren de hambre. Cuando encuentran y se fijan a la hembra, el macho segrega una enzima que digiere la piel de la boca del macho y la del dorso de la hembra, de forma que el macho se queda fijado permanentemente a la piel de la hembra cual sanguijuela, nutriéndose directamente del torrente sanguíneo de la hembra, que es mucho más grande como se observa en la figura 2. 

Fig. 2. Pareja de  Melanocetus johnsonii

La presión selectiva sobre los machos de peijesapo selecciona a aquellos con gran capacidad olfativa. Los mosquitos  macho, las polillas macho, todos tienen tremendas antenas plumosas para barrer una mayor cantidad de aire en busca de feromonas.

Fig. 3. Macho y hembra de mosquito.

En este caso la lucha por el territorio sería la búsqueda infinitesimal de la molécula de la feromona de la hembra que los guie hace el óvulo en el interior de la hembra. 

El parásito necesita una debilidad

Las arañas bola, del género Mastophora, ciertos escarabajos carabos o algunas plantas carnívoras imitan el olor de sus presas para atraerlas. Una especie de escarabajo produce un opioide y las hormigas le permiten entrar en el hormiguero en donde este "drug dealer" se alimenta de las lasvas recien nacidas. 

Ciertos tipos de orquídea le pegan en la frente de la abeja que las polinizan su órgano reproductor. La necesidad de azúcar de las abejas las convierte en parte de la estrategia reproductiva de la planta. 

Podría estar toda la tarde recordando ejemplos similares. Lo importante, a la hora de construir mi argumento, es la relación del parásito con sus presas. No las destruye, no las devora. Genera en ellas una dependencia. Busca que la dependencia sea incondicional. Cuando lo logra trata de replicar esa dependencia en otras víctimas. El parásito no destruye, somete. 

Video 1. Extracto de "El buscavidas", dirigida por Robert Rossen, Eddie, un competidor, se encuentra con Bert que lo estudia hasta que da con su debilidad. Es en ese momento cuando le dice a su oponente: "Sigue jugando, es carne de cañón"

Al competidor le duele perder su territorio, al parásito perder la obediencia de su víctima. La orina que marca el territorio de un felino, las banderas repartidas por las plazas y edificios oficiales tienen un equivalente en el mundo del parásito. Si el territorio del depredador es el espacio físico donde caza, domina y se alimenta, es decir, una extensión que refleja su poder y control inmediato, entonces el equivalente para el parásito no sería un lugar, sino una red de vínculos. No conquista terreno, sino sistemas de dependencia. El “territorio” del parásito podría entenderse como el cuerpo del hospedador, claro, pero es algo más profundo, es la mente, la voluntad o la rutina del hospedador, donde se instala y desde donde opera, ese es su territorio. La red de relaciones del hospedador, que el parásito puede usar para expandirse. El sistema simbólico o emocional que el hospedador construye alrededor del parásito: justificaciones, lealtades, miedos. En términos más abstractos, el parásito no necesita espacio físico. Su territorio es la arquitectura de la sumisión que logra construir. Mientras el depredador impone fuerza, el parásito impone necesidad. El parásito no reina sobre tierra, sino sobre conciencias.

Fig. 4. En la película "El sirviente" de Joseph Losey, el criado convierte al amo en un rehen explotando la dependencia que le genera.

Reinar sobre las conciencias requiere permanecer en el tiempo

Asimov, en su libro sobre la historia del mundo, cuando se refería a los pueblos bárbaros y a su asimilación por los pueblos en donde se asentaron, acababa la historia con un "y de esta manera desaparecieron de la historia" -no es una cita literal, es como la recuerdo- Asimov ponía el acento en que no permanecieron en el tiempo. Algo que no es verdad del todo porque esas castas militares dieron lugar a parte de la aristocracia europea. De hecho salió un estudio que demuestra que casi todos los nobles británicos proceden de la invasión normanda de Guillermo el Conquistador.

En la National Gallery de Londres hay un par de cuadros en donde, dentro del cuadro, aparece un pequeño cuadro con la genealogía del aristócrata representada como un árbol que nace del pecho de Guillermo el Conquistador. Mientras la ascendencia de los plebeyos es un árbol exponencial, donde tenemos dos padres, cuatro abuelos, ocho bisabuelos... para los aristócratas, el antepasado relevantes es solo uno, el portador del título nobiliario.

Fig. 5. A la derecha la permanencia es fundamental, a la izquierda lo fundamental es el espacio, el territorio.

Vesículas extracelulares: el ‘WhatsApp’ de las células

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https://theconversation.com/exosomas-mas-alla-de-los-tratamientos-de-belleza-244434

Los fagos ya salvan vidas en España

 Los fagos le salvan la vida a Irene, que recibió y rechazó cuatro pulmones trasplantados