miércoles, 7 de octubre de 2020
Tinción de Giemsa: teñir tejidos y células sanguíneas
Diferenciar las eubacterias en dos bloques: tinción de Gram
Clave dicotómica: aprender a discriminar
El juego de las 20 preguntas consiste en pensar que algo concreto, una cosa, persona, animal... que todo el mundo que esté jugando conozca. Las personas que jueguen tienen que adivinar qué es en menos de 20 preguntas. Las preguntas tienen que estar formuladas de manera que se pueda contestar si o no. Este juego procede del juego "Twenty questions" que se juega en los EEUU desde el SXIX.
En mis clases solía jugar este juego para explicar en qué consiste la clasificación dicotómica
Una clave dicotómica se basa preguntas sobre la presencia o no de caracteres morfológicos, de estructura, composición química... De esta pregunta parten dos soluciones posibles, en función de si tienen o no tienen determinado carácter. Las mejores preguntas son las que dividen el grupo en dos subgrupos más o menos 50% y 50%. De esa manera, a base de repetir el proceso de preguntas que dividen al grupo en subgrupos 50% y 50% podemos llegar a definir cualquier organismo vivo.
Según la distribución del peptidoglicano de la pared celular que las envuelve, se tiñen de una forma u otra, lo que permite diferenciar las bacterias en dos bloques: Bacterias Gram positivas y las Gram negativas, de gran utilidad para elegir un determinado tratamiento antibiótico.
Así, las bacterias que no se tiñen mediante esta técnica se denominan Gram negativas. Están formadas por una pared más fina formada por menos capas de peptidoglicano y una segunda membrana rica en lípidos (que repele la tinción Gram), al microscopio aparecen incoloras. La belleza de está técnica radica en que las eubacterias se dividen en Gram positivas y Gram negativas, es decir, lo que discrimina esta técnica de tinción son los dos grandes grupos en los que se dividen las eubacterias.
Las Gram positivas suelen ser cocos, es decir, bacterias esféricas debido a su mayor turgencia (presión interna) y las Gram negativas bacilos, es decir, con forma de bastones
¿Cómo teñir?
El cristal violeta se une a la pared bacteriana y se estabiliza con el lugol. La mezcla alcohol-acetona disuelve la membrana externa de las bacterias Gram negativas (más fina que la de las Gram positivas) extrayéndose el cristal violeta. Después se tiñen solo las Gram negativas con safranina.
Pasos para realizar la tinción Gram
1 Tomamos bacterias con el asa y las diluímos en una gota de agua sobre el portaobjetos. Dejamos secar
2 Gota de violeta cristal durante 1 min.
3 Lavamos con agua
4 Gota de lugol (yodo) durante 1 min.
5 Lavamos con agua
6 Lavamos con alcohol 5-10 seg.
7 Lavamos con agua
8 Gota de safranina durante 1 min.
9 Lavamos con agua y secamos. Ponemos un cubreobjetos y al microscopio.
La pared celular, clave en la tinción de Gram
La pared celular tiene que estar entrelazada para que sea una malla efectiva e impida que la célula explote debido a su turgencia o presión interna.
La penicilina impide que la pared celular forme una malla y eso provoca que la célula literalmente explote.
PREGUNTA 2: ¿Qué ocurre cuando usamos el objetivo de 100X y no usamos aceite de inmersión?
https://learn.chm.msu.edu/vibl/content/gramstain.html
https://virtuallab.tlc.ontariotechu.ca/intro.php
Laboratorio virtual – AMRITA
No corre en Chrome, hay que descargar el navegador Firefox y descargar Adobe Flash Player.
Tiene simulaciones de casi todo, pero no es interactivo
Lab virtual de micro 1: https://vlab.amrita.edu/index.php?sub=3&brch=73
Lab virtual de micro 2: https://vlab.amrita.edu/index.php?sub=3&brch=76
viernes, 2 de octubre de 2020
Jugando con el peligro: accidentes en el laboratorio
Lo mismo que en los castillos siempre hay alguna historia de fantasmas y aparecidos, en todos los laboratorios del mundo existen historias de horror, protagonizadas normalmente por un becario despistado. En el siguiente video se analizan tres accidentes mortales
Botellas de CO2: un misil en tu laboratorio
Un accidente grave que puede ocurrir en un laboratorio de microbiología es que se le rompa la válvula a las botellas de CO2. El CO2 se utiliza en los laboratorios principalmente para mantener las líneas celulares eucariotas. Por eso, al lado de la estufa de cultivo de células hay siempre una botella de CO2. Es importante que estas botellas tengan algún tipo de sujeción para evitar que se caigan y partan su válvula
Para evitar esto la mayoría de las botellas vienen con un collarín que protege la válvula en caso de caída. ¿Quieres ver que ocurre cuando la válvula se parte? la botella se convierte en un misil
Cuando la centrífuga empieza a dar saltos
Esto ocurre cuando la centrífuga no está equilibrada. La mayoría de las centrífugas modernas tienen un sensor que nos informa ya al principio de la centrifugación de un problema con el equilibrio de los tubos a centrifugar. Cuando esto ocurre la centrífuga se para. Pero ¿Qué ocurre cuando los tubos que se están centrifugando a altas velocidades pierden líquido y por tanto pierden peso?
Ocurre que la centrífuga se pone a dar saltos y destroza lo que tenga a su lado, además del hecho de quedar inservible.
Nitrógeno líquido: demasiado tentador como para no hacer experimentos estúpidos
El nitrógeno líquido se guarda en recipientes que NUNCA deben de estar cerrados herméticamente. El nitrógeno líquido es nitrógeno puro en estado líquido a una temperatura igual o menor a su temperatura de ebullición, que es de −195,8 °C a una presión de una atmósfera. El nitrógeno líquido es incoloro e inodoro. Si aumenta la temperatura comienza a hervir y pasa de líquido a gas con lo que la presión aumenta si está en un recipiente cerrado. Es tanta la presión que puede con cualquier tipo de cierre de rosca. Ojo NUNCA debe de estar en recipientes cerrados herméticamente. Recien comenzaba como alumno ayudante en el laboratorio de bioquímica me mandaron a por nitrógeno líquido. El técnico que me dio el nitrógeno (un mal técnico de laboratorio) me lo dio en un termo de café y cerró la tapa de rosca. No bien anduve 5 segundos la tapa saltó por los aires con todo el nitrógeno y miles de cristales del interior del termo. Si hubiese caminado con el termo vertical ahora estaría ciego. Menos mal que orienté la boca con una inclinación de 60 grados... afortunadamente no había nadie en el pasillo. Imprudencias que pueden cambiarte la vida.
Un divertimento del viernes por la tarde en los laboratorios es meter nitrógeno líquido en un tubo de laboratorio y cerrarlo y ver que pasa...Una salpicadura no te quema debido al efecto Leidenfrost que hace que el nitrógeno líquido, al evaporarse tan rápido, crea un colchón de gas que hace que realmente nunca entre en contacto directo con tu piel cuando se trata de una salpicadura. Otra cosa es que sumerjas en nitrógeno líquido durante cierto tiempo.
Alguna vez hemos sumergido ratones muertos en nitrógeno líquido y es sorprendente porque se congelan hasta estar totalmente cristalizados. Aviso, los ratones se sacrificaban semanalmente para obtener macrófagos de su médula. Estábamos estudiando bacterias que viven en el interior de los macrófagos.jueves, 1 de octubre de 2020
Matar bacterias por calor
En los laboratorios de microbiología se utiliza el autoclave para esterilizar, es decir, para asegurarnos que eliminamos el 100% de las bacterias. El autoclave no es otra cosa que una olla a presión. Si hervimos agua al nivel del mar, por ejemplo en Guayaquil, el agua alcanza los 100ºC de temperatura. En cambio, en Quito, a 2800 metros de altura, existe menos presión atmosférica y el agua hierve a 91º de temperatura. Mientras tengamos agua en ebullición se mantendrá constante esta temperatura. 100ºC mata a la mayoría de las bacterias, pero no a todas. Hay bacterias que sobreviven en agua hirviendo. Además, la mayoría de las esporas de bacterias y hongos resisten estas temperaturas. ¿Qué es lo que hace que el autoclave elimine el 100% de bacterias y hongos?. Al tener una tapa hermética permite que aumente la presión en el interior de la olla y por eso se alcanzan temperaturas de 120ºC, o en los autoclaves modernos, de 134ºC. De esta manera, con un ciclo de 20 minutos a estas temperaturas nos garantizamos el haber eliminado el 100% de microorganismos o de sus esporas.
El primer autoclave fue la marmita de Papin.
Olla a presión de Papin. Foto proveniente de la colección del MUNCYT.
Papin (1647-1712) fue el inventor de la marmita de Papin, una olla a presión precursora del autoclave. Papin la utilizó básicamente para recocer los huesos, de hecho se le llamó trituradora de huesos. Posteriormente se utilizaría como autoclave para esterilizar material.
El primer envase estéril al calor fue desarrollado sin saber que eran las bacterias las que pudrían los alimentos:
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| Botella utilizada por Nicolás Appert (1749-1841) |
Nicolás Appert (1749-1841) durante años buscó resolver cómo preservar la comida sin que se pudriese. Lo consiguió hirviendo la comida en unas botellas de vidrio y tapándolas con un corcho que luego se sellaba con alambre y lacre. Appert no sabía la razón de porqué la comida preservada con su métodos no se pudría. Appert había descubierto la tecnología de la conserva moderna. Una tecnología que daría lugar a una industria hoy en día muy potente.
viernes, 18 de septiembre de 2020
Bacterias en los pezones como excusa para vender leche en polvo

lunes, 17 de agosto de 2020
Bendita selección natural
Desgraciadamente si un estúpido tiene una actitud contraria a la una norma aceptada por todos tiene que ser castigado. La estupidez no debe campar libremente porque haya un sistema de salud público que se va a a hacer cargo. Siempre llamó la atención que las urgencias de los hospitales en España, normalmente saturadas, estuviesen vacías cuando había partido Madrid-Barcelona. Para evitar ese tipo de abusos hubo partidos políticos que sugirieron el copago sanitario, una medida que perjudicaba sobre todo a los jubilados. Hay otras medidas punitivas que no se discuten: la obligatoriedad del uso de cinturón de seguridad en los coches. Si alguien es tan estúpido de no llevar el cinturón creo que lo mejor sería animarlo a que no lo use para que la selección natural se lo lleve a la mínima. En caso de no usar cinturón de seguridad las aseguradoras no deberían de hacerse cargo y en urgencias de los hospitales se les debería de atender al último. Si, ya se. Lo que estoy diciendo es horrible y haría de los médicos jueces que decidirían sobre la vida de las personas. Algo que les envilecería.
jueves, 13 de agosto de 2020
Cinco marcadores útiles para detectar covid 19 grave
IL-6: Interleucina 6. Un marcador inflamatorio que puede ser útil para detectar la llamada "tormenta de citoquinas" de la que ya se hablado bastante. La InterLeuquina 6 (IL-6) es una citoquina clave en el sistema inmunitario.
www.misistemainmune.es/cual-es-el-papel-de-la-interleuquina-6/
Ya se ha hablado de la respuesta inmunitaria exagerada frente al virus, que exige una actuación rápida y diversos tratamientos inmunoterapéuticos, tales como anticuerpos monoclonales (AM) dirigidos frente a citocinas (receptor de interleucinas IL-6 e IL-1). La determinación de los niveles de IL-6 está indicada antes de iniciar el tratamiento con tocilizumab, habiendo establecido el Ministerio de Sanidad unos niveles mayores de 40 pg/ml en adultos y de 35 pg/ml en niños como requisitos para indicación de tratamiento.
Dímero D Son los "restos" que quedan tras la eliminación de un trombo. Su elevación en el plasma indica que se han formado coágulos por lo que sirve para el diágnóstico de la trombosis venosa profunda, otra de las famosas consecuencias de la covid-19 en los pacientes graves.Por lo tanto, el dímero D es un fragmento de proteína que se produce cuando un coágulo de sangre se disuelve en el cuerpo.
medlineplus.gov/spanish/pruebas-de-laboratorio/prueba-del-dimero-d/
es.cochrane.org/es/recursos/evidencias-covid-19/el-valor-d-dímero-est

La ferritina es una importante proteína intracelular de almacenamiento de hierro en todos los organismos. Funciona como reactante de fase aguda, por lo que han visto que puede ser útil para detectar los procesos inflamatorios graves del covid-19. La ferritina es capaz de activar los macrófagos, un tipo de glóbulos blancos del sistema inmunológico.:www.infosalus.com/salud-investigacion/noticia-altos-niveles-ferritina-
LDH lactato deshidrogenasa (LDH) Es una enzima que se encuentra en prácticamente todos los tejidos del cuerpo humano. Desempeña un papel importante en la respiración celular (el proceso en el cual la glucosa (azúcar) proveniente de los alimentos se convierte en energía que puede ser utilizada por las células). Si bien la LDH es abundante en las células de los tejidos, los niveles en la sangre son, por lo general, bajos. Sin embargo, cuando los tejidos se dañan a causa de una lesión o una enfermedad, liberan más LDH en el torrente sanguíneo. www.rchsd.org/health-articles/anlisis-de-sangre-lactato-deshidrogenasa
Estos marcadores deben de estar en relación a las tres fases del desarrollo de la Covid-19

Las tres fases de la COVID-19. A medida que la enfermedad se agrava aumentan determinados parámetros analíticos como el dímero-D, indicador de la existencia de niveles anormales de fibrina y, por tanto, de trombosis. Fuente: Siddiqi & Mehra
Referencia:
The association between biomarkers and clinical outcomes in novel coronavirus pneumonia in a US cohort. Future Medicine. Shant Ayanian, Juan Reyes, Lei Lynn & Karolyn Teufel
Published Online:17 Jul 2020https://doi.org/10.2217/bmm-2020-0309
miércoles, 5 de agosto de 2020
Pasos para lavarse las manos
2- Después te pones jabón y frotas tus manos con él, por ambos lados, entre los dedos, bajo las uñas
3- Frótalas como mínimo entre 20 y 30 segundos. Hay quien dice que cantar o tararear la canción del “Happy birthday” mientras lo haces te puede ayudar a saber si le dedicaste el tiempo suficiente
4- Te enjuagas con agua.






































